Đặc tính sản phẩm
Cetyltrimethylammonium bromide (CTAB) là chất tẩy rửa không chứa ion có thể kết tủa nucleic acid và polysaccharide. CTAB có khả năng liên kết thuận nghịch với DNA và polysaccharide, cụ thể ở nồng độ muối cao (ví dụ: NaCl 1.4 M có trong đệm chiết) thì CTAB kết hợp với DNA và polysaccharide, nhưng phức hợp CTAB-DNA tồn tại ở trạng thái hòa tan, trong khi đó phức CTAB-polysaccharide lại kết tủa. Sau quá trình ly giải bằng CTAB, DNA được phân lập và tinh chế với sự hỗ trợ của các dung dịch chloroform, isopropanol, ethanol 70%.
Cetyltrimethylammonium bromide (CTAB Solution)
Hướng dẫn sử dụng
Quy trình tham khảo ly trích DNA thực vật sử dụng dung dịch CTAB:
- Nghiền nhỏ 5g mẫu thực vật bằng cối và chày trong nitơ lỏng.
- Thêm 500 μl dung dịch CTAB. Trộn kỹ.
- Ủ mẫu ở nhiệt độ 65°C trong 30 phút.
- Thêm 200 μL Chloroform: Isoamylalcohol 24:1 vào hỗn hợp và trộn thật kỹ.
- Ly tâm 13000 rpm trong 5 phút. Hút 500 μL dịch nổi chuyển sang tube mới.
- Bổ sung Isopropanol tuyệt đối lạnh (2-8°C) với tỉ lệ 1:1 và ủ ở -20°C trong 10 phút.
- Ly tâm mẫu 13000 rpm trong 10 phút.
- Loại bỏ dịch nổi, sau đó rửa bằng 500 μl Ethanol 70%, làm khô hoàn toàn DNA.
- Tái huyền phù DNA trong 50 μl TE (10 mM Tris, 1 mM EDTA, pH 8).
Khuyến cáo/ Cảnh báo
- Sử dụng bảo hộ (găng tay, khẩu trang, mặt nạ phòng độc,…) khi tiếp xúc với hóa chất.
- Cần cẩn trọng khi sử dụng nitơ lỏng, chloroform:isoamyl alcohol (24:1).
- Nitơ lỏng có khả năng cháy và gây bỏng lạnh.
Tham khảo thêm:
Đánh giá
Chưa có đánh giá nào.