Đặc tính sản phẩm
CTAB có khả năng liên kết thuận nghịch DNA và polysaccharide, cụ thể ở nồng độ muối cao (treeb 1.4M NaCl có trong đệm chiết) thì CTAB kết hợp với DNA và polusaccharide, nhưng phức hợp CTAB-DNA tồn tại ở trạng thái hào tan, trong khi có phức CTAB-polysaccharide lại kết tủa. Sau đó, DNA được tinh chế bằng cách sử dụng các dung môi hữu cơ và rượu khác nhau như phenol và chloroform.
Hướng dẫn sử dụng
- Nghiền nhỏ 5g mẫu thực vật bằng cối và chày, làm lạnh bằng nitơ lỏng
- Đối với mẫu mô đồng nhất, thêm 500 μl CTAB Buffer. Trộn và vortex kỹ.
- Đun sôi mẫu ở nhiệt độ 60-65°C trong 30 phút.
- Ly tâm đồng nhất trong 5 phút ở 10.000 x g. Chuyển phần nổi phía trên sang một ống mới.
- Thêm 5 μl dung dịch RNase A và ủ ở 37°C trong 20 phút.
- Thêm một thể tích bằng phenol/chloroform/isoamyl alcohol (25:24:1).
- Vortex trong 5 giây sau đó ly tâm mẫu trong 1 phút ở 10.000xg để tách các pha. Chuyển pha nước phía trên sang một ống mới. Lặp lại quá trình chiết này cho đến khi pha trên
Đánh giá
Chưa có đánh giá nào.