CHLOROFORM: ISOAMYL ALCOHOL (24:1)

Đặc tính sản phẩm

Chloroform: Isoamyl Alcohol 24:1 làm biến tính protein, hỗ trợ phân tách pha hữu cơ và pha nước, giảm sự tạo bọt trong quá trình quá trình ly trích. Bay hơi mạnh, độc tính cao, bốc cháy khi nhiệt độ trữ ở 85°C, hạn chế tiếp xúc trực tiếp. Thường được sử dụng trong tách chiết DNA/RNA bằng phương pháp tách lớp.

Chloroform: Isoamyl Alcohol 24:1

Hướng dẫn sử dụng

Chloroform: Isoamyl alcohol 24:1 được sử dụng để tách lớp hỗn hợp ly giải thành 2 lớp, trong đó lớp nước ở trên chứa DNA/RNA. Dưới đây là 1 ví dụ về quy trình ly trích DNA/RNA có sử dụng Chloroform: Isoamyl alcohol 24:1:

• Nghiền nhỏ 5g mẫu thực vật bằng cối và chày trong nitơ lỏng.
• Thêm 500 μl dung dịch CTAB. Trộn kỹ.
• Ủ mẫu ở nhiệt độ 65°C trong 30 phút.
• Thêm 200 μL Chloroform: Isoamyl alcohol 24:1 vào hỗn hợp và trộn thật kỹ.
• Ly tâm 13000 rpm trong 5 phút. Hút 500 μL dịch nổi chuyển sang tube mới.
• Bổ sung Isopropanol tuyệt đối lạnh (2-8°C) với tỉ lệ 1:1 và ủ ở -20°C trong 10 phút.
• Ly tâm mẫu 13000 rpm trong 10 phút.
• Loại bỏ dịch nổi, sau đó rửa bằng 500 μl Ethanol 70%, làm khô hoàn toàn DNA.
• Tái huyền phù DNA trong 50 μl TE (10 mM Tris, 1 mM EDTA, pH 8).

Tham khảo thêm:

• Các hóa chất khác
• Hướng dẫn sử dụng