Đặc tính sản phẩm
Phenol, saturated (pH4.5) tạo pha hữu cơ, có khả năng phân tách RNA khỏi protein. pH của Phenol có vai trò định vị vị trí phân lớp của DNA ở trong hỗn hợp tách chiết, khi pH 4.5 DNA sẽ được tách hoàn toàn khỏi pha nước và định vị ở bề mặt phân cách với protein.
Với tính chất bay hơi mạnh, độc tính cao, khuyến cáo nên hạn chế tiếp xúc trực tiếp đồng thời trang bị bảo hộ đầy đủ.
Ngoài ra, khi để lắng sẽ phân tách thành 2 pha, gồm pha nước bên trên và pha phenol bên dưới. Do tính chất dễ bị oxy hóa và thời gian oxi hóa nhanh hơn khi ở pH cao nên pha nước được giữ lại ở với lượng thích hợp để ngăn chặn phenol tiếp xúc với không khí. Khuyến cáo không loại bỏ phân lớp nước tránh ảnh hưởng đến hiệu quả tách chiết và thời hạn bảo quản sản phẩm.
Phenol saturated pH 4.5 – Chai 100mL
Hướng dẫn sử dụng
Phenol saturated pH 4.5 thường được phối trộn với Chloroform và Isoamylalcohol theo tỉ lệ Phenol:Chloroform:Isoamylalcohol 25:24:1 để sử dụng trong tách chiết RNA. Dưới đây là 1 quy trình tham khảo để tách chiết RNA:
- Bước 1: Cho lượng mẫu đã đồng nhất và lượng Phenol:Chloroform:Isoamylalcohol 25:24:1 bằng nhau vào tube và vortex đều
- Bước 2: Ly tâm 13000 rpm ở 2-8°C trong 5 phút
- Bước 3: Hút giữ phần dịch nổi, chủ yếu ở bề mặt phân cách với protein, chú ý không hút phân lớp phenol hoặc các chất tủa
- Bước 4: Bổ sung isopropanol tuyệt đối lạnh (2-8°C) với tỉ lệ 1:1 và ủ ở -20°C trong 10 phút
- Bước 5: Ly tâm mẫu 13000 rpm trong 10 phút
- Bước 6: Loại bỏ dịch nỗi, sau đó rửa bằng 500 μl Ethanol 70%, làm khô hoàn toàn RNA
- Bước 7: Tái huyền phù RNA trong 50 μl nước sạch nuclease.
Tham khảo thêm:
Đánh giá
Chưa có đánh giá nào.